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　　3) 收集细胞后7/19/2024mt4代理商3. 7-AAD 为潜正在致癌物，操作时请采纳防护手腕，穿防护服、戴手套等。

　　4. 本试剂盒合用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数目不以应低于1×105，，不推选用于检测机合样本。

　　5. 推选操纵悬浮培育细胞。假若是贴壁细胞，倡议合用不含EDTA 的胰酶消化，如消化欠妥，或者惹起假阳性，而用细胞刮子会酿成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保生活含2%BSA 的PBS 中，预防进一步的毁伤。

　　7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂品种、操纵的检测仪器区别，因此流式检测的荧光抵偿也区别，以是倡议每次检测均需操纵未经凋亡诱导管理的细胞动作比照，举办荧光抵偿的调整。

　　MS049是一个强的，有挑选性的，有细胞活性的PRMT4和PRMT6双重压迫剂，IC50区分是34nM和43nM。

　　积储条款：-20℃，有用期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量正在一个月内操纵。

　　1.离心吸附柱内硅基质膜整体采用进口寰宇闻名公司特造吸附膜，柱与柱之间吸附量区别极小，可反复性好。征服了邦产试剂盒膜质料担心靖的缺陷。

　　2.操纵了优质溶胶液，不含守旧溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不压迫接收后酶切、连合克隆等下逛响应。

　　3.特殊的溶胶液/联结液配方，将溶胶和联结两种功效联合，以是一个试剂盒能够利用于琼脂糖DNA接收、PCR产品明净纯化、酶切产品纯化接收等众种情景，减削了需进货众种试剂盒的用度，

　　4.溶胶液/联结液调造成为了黄颜色，便于窥察溶胶效益和监测pH值转折从而抵达最佳联结效益，大大降低接收功用。

　　5.矫正的溶胶液配方,大大降低了缓冲材干和安靖性，假使样品转折很大也能将PH缓冲正在最佳联结局限内。

　　合于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化年华不宜过长或过短，最好是正在轻轻奏乐能够使贴壁细胞奏乐下来时，插足细胞培育液，将细胞轻轻奏乐下来，挪动到离心管内，500-1000g离心5min网罗细胞。

　　3) 网罗细胞后，插足预冷PBS溶液轻摇或用移液器柔柔奏乐洗涤，离心网罗细胞，共洗涤两次。

　　染色孵育后，每管插足400μl 1×Binding Buffer事情液，混匀后操纵流式细胞仪检测（1小时内检测）。

　　倡议修立经凋亡诱导的平常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个比照组，平常细胞组可动作荧光抵偿调整去除光谱重叠和设定十字门的处所。结果可用CellQuest等软件举办解析，绘造双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI笼络操纵时，活细胞仅有很低强度的布景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和赤色双重荧光。

　　染色孵育后涂片，显微镜下窥察。操纵荧光显微镜上的蓝光和绿光通道区分窥察FITC和PI。被Annexin V-FITC联结的细胞显示浆膜上有绿色光环。耗损细胞膜无缺性的细胞，细胞核显示赤色，膜上有绿色光环。